微生物学

1、 海南大学环境与植物保护学院 谭志琼 环境微生物学实验 海南大学环境与植物保护学院 谭志琼 n本课程是环境科学、农业资源与环境等专业开设的一门 独立的专业基础课实验 ,其宗旨是着重训练学习掌握微 生物学最基本的操作技能，如显微镜的使用方法，微生 物的基本形态观察，细菌染色技术，土壤、水体、空气 中微生物的检测等。
了解微生物的基本知识，通过观察 具体材料和实验结果以加深理解和巩固课堂讲授的。

2、加2%琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是 1%。
( )6. 稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。
( )7. 细菌中紫外线引起的突变是由于相邻鸟嘌呤分子彼此结合而形成二聚体的突变。
( )8. 大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物。
( )9. 自发突变是指那些实验室中由于加入诱变剂所发生的突变。
( )10. 内生菌根的真菌可进入根的皮层间隙和细胞内部，在根外较少，不形成菌套。
( )11. 英国科学家罗伯特虎克在观察标本中观察到了一段线状的细菌。
( )12. 所有的微生物都能利用氨态氮作为氮源。
( )13. 发酵是微生物以无机物作为最终的电子受体的生物氧化过程。
( )14. 蓝细菌是好氧细菌，通过糖酵解过程，利用光能产生它们的糖类。
( )15. 固氮酶只有在严格厌氧条件下才有活性，所以固氮菌均为厌氧菌。
( &。

3、种分离技术，培养技术。
3.简述微生物生物学发展史上的5 个时期的特点和代表人物.答:史前期（约8000 年前1676），各国劳动人民，未见细菌等微生物的个体；凭实践经验利用微生物是有益活进行酿酒、发面、制酱、娘醋、沤肥、轮作、治病等）初创期（16761861 年），列文虎克，自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体；出于个人爱好对一些微生物进行形态描述；奠基期（18611897年），巴斯德，微生物学开始建立；创立了一整套独特的微生物学基本研究方法；开始运用“实践理论实践”的思想方法开展研究；建立了许多应用性分支学科；进入寻找人类动物病原菌的黄金时期；发展期（18971953年），e.buchner，对无细胞酵母菌“酒化酶”进行生化研究；发现微生物的代谢统一性；普通微生物学开始形成；开展广泛寻找微生物的有益代谢产物；青霉素的发现推动了微生物工业化培养技术的猛进；成熟期（1953至今）j.watson 和f.crick，广泛运用分子生物学理论好现代研究方法，深刻揭示微生物的各种生命活动规律；以基因工程为主导，把传统。

4、体对宿主体表的吸附，向体内侵入，在体内定居、生长和繁殖，向周围组织的扩散蔓延，对宿主防御功能的抵抗，以及产生损害宿主的毒素等一系列能力的总和。
同一细菌的不同毒株，其毒力不一样。
4菌落：是在固体培养基上以母细胞为中心的肉眼可见的，有一定形态、构造等特征的子细胞集团。
5消毒：消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌6转化：受体菌接受供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象，就称转化。
9化能无机自养型微生物：以还原态无机物作为能源，以无机物作为供氢供CO2主要或唯一碳源而生长的微生物。
10准性生殖：是指某些丝状真菌特别是不产生有性孢子的丝状真菌，其二倍体体细胞在有丝分裂过程中染色体单倍体化或偶尔发生同源染色体交换，即不经减数分裂就导致基因重组的生殖过程11.protoplast：原生质体，是指G+细菌被溶菌酶或青霉素分子处理后所形成的无壁、只由细胞膜包围，对渗透压敏感的球形细胞。
12.脂多糖：革兰氏阴性菌细胞外膜伸出的特殊结构，即是细菌内毒素。
13芽胞：细菌在特殊环境或不良环境下形成的一种非可培养状态。
14.LD50。

5、登记表课程编号课程名称微生物学和微生物学检验英文课程名称Microbiology and Microbiology Test课程类型卫生检验专业课开课系所号开课学期（上）本研标志本科生课程学 时学 分考试类型笔试考查开设日期2002.8结束日期2003.1课程分类必修课选修主课名称先修课程课内总学时42实验总学时48讲课总学时90上机总学时0CAD总学时0CAI总学时0讨论辅导总学时2设计作业总学时0课外总学时0课外学分0课程负责人师资队伍 龚忠发 姚苹 宋艳艳基本面向卫生检验专业教学方式 讲课 实验教 材微生物学和微生物学检验参考书医学微生物学、现代医学微生物学、临床微生物学及检验课程说明本课程属于卫检专业、预防医学专业基础学科，需要一定的医学基础与临床知识。
内容简介（200。

6、不行光合作用。
植物界 Plantae：具有细胞壁，不运动，可行光合作用。
三界：原生生物界 Protista：（E. H. Haeckel, 1866年提出）2、五界系统R. H. Whitakker, Science, 163: 150-160, 1969原核生物界 Monera：细菌、放线菌等原生生物界 Protista：藻类、原生动物、粘菌等真菌界 Fungi：酵母、霉菌动物界 Animalia：植物界 Plantae：五界系统是以细胞结构分化的等级以及和光合、吸收、摄食这三种主要营养方式有关的组织类型为基础的。
六界：加上病毒界。
3、三界（域）系统Woese用寡核苷酸序列编目分析法对60多株细菌的16SrRNA序列进行比较后，惊奇地发现：产甲烷细菌完全没有作为细菌特征的那些序列，于是提出了生命的第三种形式-古细菌(archaebacteria)。
随后他又对包括某些真核生物在内的大量菌株进行了16SrRNA(18SrRNA)序列的分析比较，又发现极端嗜盐菌和极端嗜酸嗜热菌也和产甲烷细菌一样，具有既不同其他细菌也不同于。

7、三者共存的原理，应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应，从而推测机体对结核有无相应免疫力的种试验。
3.质粒答:是细菌染色体以外的遗传物质，为环状闭合双链DNA结构。
特点：可自行丢失与消除；可转移性；具有自我复制能力；可编码控制细菌某些性状特征；相容性与不相容性；常见质粒：F质粒，R质粒。
4.转化答: 供体菌游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的性状。
举例：Griffith肺炎球菌转化实验5.脓毒血症答: 是指由感染引起的全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS），临床上证实有细菌存在或有高度可疑感染灶。
虽然脓毒症是由感染引起，但是一旦发生后，其发生发展遵循其自身的病理过程和规律，故从本质上讲脓毒症是机体对感染性因素的反应。
6.汹涌发酵答: 产气 荚膜梭菌在牛奶培养基中能分解乳糖产酸，使酪 蛋白凝固；并产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成 蜂窝状，气势汹涌，称汹涌发酵7.Virus答: 病毒(virus)是由一个核酸分子（DNA或RNA）与蛋。

8、 B.抗干燥作用 C.抗有害物质的损伤作用D.与细菌鉴别有关 E.与某些细菌的分型有关 5.IMViC试验主要用于区别下列哪两种病原菌 A.产气杆菌 B.破伤风梭菌 C.葡萄球菌 D.大肠杆菌 E.肺炎球菌 6.细菌的合成代谢产物是指 A.热原质 B.毒素 C.透明质酸酶 D.色素 E.抗生素 7.细菌的分解代谢产物是指 A.细菌素 B.硫化氢 C.吲哚 D.维生素 E.外毒素 8.吲哚(靛基质)试验呈阳性的细菌是 A.霍乱弧菌 B.伤寒杆菌 C.肺炎杆菌 D.变形杆菌 E.大肠杆菌 9.产硫化氢的致病菌是 A.鼠伤寒杆菌 B.大肠杆菌 C.痢疾杆菌 D.变形杆菌 E.肺炎杆菌 10.专性厌氧生长的细菌是：A.破伤风梭菌 B.空肠弯曲菌 C.幽门螺杆菌 D.脆弱类杆菌 E.葡萄球菌 11.专性需氧生长的细菌是：A.结核分枝杆菌 B.霍乱弧菌 C.伤寒杆菌 D.绿脓杆菌 E.链球菌 12.湿热灭菌优于干热灭菌的是 A.导热快 B.穿透力强 C.比干热灭菌所需的温度低 D.潜热 E.使细菌蛋白迅速凝固。

9、菌。
2. 结核菌素试验答:是根据MTB感染、免疫、变态反应三者共存的原理，应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应，从而推测机体对结核有无相应免疫力的种试验。
3. 质粒答: 是细菌染色体以外的遗传物质，为环状闭合双链DNA结构。
特点：可自行丢失与消除；可转移性；具有自我复制能力；可编码控制细菌某些性状特征；相容性与不相容性；常见质粒：F质粒，R质粒。
4. 转化答: 供体菌游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的性状。
举例：Griffith肺炎球菌转化实验5. 脓毒血症答: 是指由感染引起的全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS），临床上证实有细菌存在或有高度可疑感染灶。
虽然脓毒症是由感染引起，但是一旦发生后，其发生发展遵循其自身的病理过程和规律，故从本质上讲脓毒症是机体对感染性因素的反应。
6. 汹涌发酵答: 产气 荚膜梭菌在牛奶培养基中能分解乳糖产酸，使酪 蛋白凝固；并产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成 蜂窝状，气势汹涌，称汹涌发酵7.。

10、称下呼吸道，通常无菌。
下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染（肺炎、肺脓肿）等。
病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。
1痰标本培养前处理 不含或含粘液很少的合格标本，可直接接种，遇有含大量粘液的标本，应加入等量的液化剂（如pH7.6的10g/L胰酶溶液等），放置35待充分液化再行接种。
亦可加液化剂后用旋转混匀器搅拌混匀，3000r/min离心10min弃上清液，取沉淀物接种。
2.分离培养 （1）一般细菌培养应同时划区接种： 1）血平板 适用于分离肺炎链球菌和其他细菌。
2）加抗生素的巧克力平板 适用于分离嗜血杆菌。
3）麦康凯/中国兰平板 适用于分离革兰阴性杆菌。
血平板加抗生素的巧克力平板麦康凯中国兰平板肺炎链球菌和其他细菌嗜血杆菌革兰阴性杆菌（2）分离培养 血平板和巧克力平板置5%CO2环境，麦康凯平板/中国兰平板置普通孵箱，35孵育。
1.痰标本中需要检测的主要致病菌：肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌（可引起原发性肺炎）、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌（各种器官的化。

11、免疫细胞71.固有免疫细胞72.抗原提呈细胞及其抗原提呈作用73.适应性免疫细胞7第五章免疫应答81.固有免疫应答82.适应性免疫应答8第六章免疫病理81.超敏反应8型超敏反应9型超敏反应9型超敏反应9型超敏反应9第七章免疫学应用102.免疫预防10第八章病原生物学绪论101.病原生物与病原生物学102.医学微生态104.病原生物控制与生物安全11第九章细菌学总论111.细菌的形态结构112.细菌的生理124.细菌感染与免疫12第十章常见致病细菌131.球菌133.厌氧性细菌144.分枝杆菌145.其他原核细胞型微生物14第十一章病毒学总论151.病毒的形态结构152.病毒的增殖、遗传和变异153.病毒感染与免疫154.病毒感染的检测方法与防治原则16第十二章常见致病病毒161.呼吸道病毒162.消化道病毒173.肝炎病毒175.逆转录病毒18。

12、化、遗传学时期：代表人物：Buchner，开创微生物生化研究；Doudoroff，建立普通微生物学。
4成熟期-分子生物学时期二.什么是微生物？ 广义的微生物和主要包括哪几大类？1微生物的定义：微生物是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。
2微生物主要包括：病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类。
3微生物分类：六界（病毒界1977年加上，我国陈世骧）：三元界：三.微生物具有哪些主要特性？ 试简要说明之。
1体积小，比表面积大。
2吸收多，转化快。
3生长旺，繁殖快。
4适应性强，易变异。
5分布广，种类多。
四.细菌有哪几种基本形态？ 其大小及繁殖方式如何？1细菌的基本形态分为：球形或椭圆形、杆状或圆柱状、弧状和螺旋状，分别称为球菌、杆菌、弧菌和螺旋菌。
2细菌细胞的大小一般用显微测微尺测量，并以多个菌体的平均值或变化范围来表示。
3细菌的繁殖主要是简单的无性的二均裂殖。
球菌：单球菌，双，链，四联，八叠，葡萄球菌。
大小以直径表示杆菌：种类最多，长杆菌（长/宽2）；杆菌（=。

13、链杂交体，通过杂交标记物的检测，鉴定标本中的相应病原体基因，此为核 酸杂交法。
由于探针标记技术的不断改进，检测试剂盒的商品化，操作更简便易行，在临床病 原体实验诊断中广泛应用。
值得注意的是，由于 PCR 具有很高的敏感性，因而影响试验的因素 很多，必须防止污染并设立阴性对照才能对试验结果作出正确判断。
【临床意义临床意义】 】 适用于临床标本中尚不能分离培养或很难分离培养的病原微生物，如病毒、立克 次体、结核分枝杆菌等的检测。
【分子诊断技术的优点分子诊断技术的优点】 1 具有高度的特异性：选择核酸探针时首先考虑的是它的高度特异性。
只有特异的探针与特定 的核酸序列发生特异性互补，才可检测标本中的特定基因序列。
2 很高的敏感性：分子诊断技术可直接检测临床标本中微生物的 DNA ，还能检测经培养分离 物中细菌的特异性基因，放射性核素标记的基因探针具有很高的比放射性活性。
核酸扩增技术 可以将靶基因放大上百万倍，检测 DNA 可以达到 pg 或 fg 水平。
3 检测范围广泛：分子诊断技术可以检测各种微生物的病原，也可检测细菌的各种毒素、细菌 的耐药性基因，可检测微生物的培养分离。

14、生学说;柯赫 1969 年，R.H.Whittaker 提出将生物划分为：_、_ _、_、_和_。
原核生物界;原生生物界;真菌界;植物 界;动物界 AIDS 被称为_，由_病毒引起，简写为HIV。
艾滋病;人类免疫缺陷 病毒的化学组成主要是_和_。
蛋白质;核酸 病毒的壳体结构有三种主要的对称方式，他们是：_对 称，_对称和_对称。
螺旋;二十面体;复合 病毒没有_结构，主要成分是_和_。
由于衣壳粒的排列组合不同，使病毒有不同的构型，主要有_ _、_和_三种对称性构型。
细胞;蛋白质;核酸;螺旋对称;二十面体 对称;复合对称 当一种微生物生活在土壤中，它与其他生活在土壤中的微生物之 间的关系可表现为_、 _、 _。

15、使用流程 1. 使用前应先检查各部件是否正常，尤其是压力表和安全阀是否灵敏确实 2. 加水。
打开锅盖向外锅加水加到止水线，手提式高压蒸汽灭菌锅无止水 线，则加水量为灭菌锅与灭菌室口平即可 3. 将包好的物品的管口、瓶口向上放入灭菌室，不要放得太紧，以免影响蒸 汽的流通和灭菌效果 4. 盖好盖子。
上锅盖时螺丝要对角上紧，使蒸汽锅密闭勿 1 使漏气，上盖时应注意，将连在排气孔上的排气软管插入灭菌室壁上的管内， 这样排气完全，因空气比水蒸气重一点 5. 打开排气孔，加热。
当水沸后就逐渐排气，当看见水蒸气排出，一般需再 排气 3,5min，可见大量热蒸汽冲出排气孔，此时锅内冷空气已排尽，关闭排气 阀，温度即随压力升高而上升 6. 关闭排气阀，继续加热，温度即随压力升高而上升 ！ ！ 7. 当指针指到所需压力时，控制火源以维持恒压，并开始计算灭菌时间。
经 一定时间停止加热(一般培养基和器皿灭菌控制在压力1.05kg/cm2，温度121 ?， 时间 15,30min)，压力随之逐渐下降 8. 当压力指针回到零点时，即可开盖，取出灭菌物品，趁热摆成。

16、于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物。
（ ）4遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。
（ ）5细菌的芽孢、放线菌和真菌的孢子都是繁殖体。
（ ）6处于生长稳定期的细菌培养物细胞数量最大，生长速率最高。
（ ）7异型乳酸发酵的终产物是乳酸、乙醇和CO（ ）8促进扩散是逆浓度运输，需载体蛋白。
（ ）9There are many different kinds of fermentation, such as lactic acid fermentation, which is carried out by yeasts.（ ）10对儿童注射胎盘丙种球蛋白通常用于治疗或应急预防微生物引起的疾病，它是一种主动免疫。
（ ）11金黄色葡萄球菌和肉毒梭菌都能产生耐热性强的毒素。
（ ）12. 工业上常用的微生物连续培养方式为恒化培养。
（ ）13. 土壤和空气是微生物栖息繁殖的良好环境。
（ ）14. 荚膜是细菌的特殊构造，其与细菌的致病性有关。
（。

17、类、抵抗力 )和微生物学检验 (具体要求见实验部分 ) 【熟悉】 葡萄球菌属 的致 病性和免疫性。
【了解】 葡萄球菌属所致疾病 的防治原则 。
教学重点及难点 葡萄球菌的主要生物学特性及微生物学检验 程序、检验方法。
教法与 学法 启发式 讲授法 、比较、归纳 课型 理论课 教学手段 多媒体 教学 内容 与 时间 分配 第十六章 球 菌 一、 葡萄球菌属 （一） 的 生物学特性 （ 15 min） （二） 致病性和免疫性 （ 10min） （三） 葡萄球菌微生物学检验 （ 20min） 二、 链球菌属 （一）链球菌的生物学特性、 致病性 （ 35min） 小结 （ 10min） 复习 思考题 1、球菌检验的程序如何？ 2、葡萄球菌分哪些种类？ 致病性 葡萄球菌的鉴定依据 有哪些？ 参考资料 1、 张卓然主编 临床微生物学与微生物检验 人卫出版社 第 3 版 2006.11 2、 倪语星主编 临床微生物学与检验 人卫生出版社 第 4 版， 2007 年 3、 余贺主编 医学微生物。

18、为调理作用。
3、超抗原 ： 是一种不需要抗原 提呈细胞 加工、处理、在极微量的浓度下，即可激活大量免疫细胞，产生极强的免疫应答的物质。
4、 APC：是 抗原 提呈细胞，能捕捉 、加工、处理抗原，并将抗原信息提呈给抗原特异性淋巴细胞的一类免疫细胞称抗原提呈细胞。
5、佐剂 ： 指与抗原一起 或 预先注入机体，可增强机体对该抗原的特异性免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
6、细胞因子 ： 是细胞经刺激后合成 、 分泌的具有高活性、多功能的低分子量可溶性蛋白质，通过自分泌或旁分泌的方式作用于自身或临近细胞。
7、 ADCC： 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用，当 IgG 类 抗体与肿瘤或病毒感染细胞表面相应抗原表位特异性结合后， 其 Fc 段可与 NK 细胞 、巨噬细胞和中性粒细胞表面的 Fc受体结合，促使上述细胞对靶细胞的杀伤作用，简称 ADCC效应 。
8、补体 ： 补体是 存在于血清 、 组织液和细胞膜表面的一组与免疫有关、经活化 后 具有酶活性的不耐热的球蛋白。
9、表位 ： 又称抗原决定簇，是决定抗原特异性的基本结构单位，可与抗原受体及抗体形成空间互补。
10、超敏反应 ： 机体。

19、 （ ） A为外毒素经甲醛处理后获得 B可中和游离外毒素性作用 C可中和与易感细胞结合的外毒素的毒性作用 D由细菌内毒素刺激机体产生 4关于病毒核酸： （ ） A可控制病毒的遗传和变异 B决定病毒包膜所有成分的形成 C RNA 不能携带遗 传信息 D不能决定病毒的感染性 5病毒的致病因素： （ ） A内毒素 B外毒素 C荚膜 D以上都不是 6对外界抵抗力最强的细菌结构： （ ） A细胞壁 B荚膜 C芽孢 D核质 7 L 型细菌特性： （ ） A需用低渗含血清培养基： B对青霉素敏感 C细胞膜缺乏 D细胞壁缺损 8关于外毒素，下列说法正确的是： （ ） A性质稳定。

20、增值 病毒 原核细胞型微生物 无核膜、核仁，仅有核糖体 DNA 和 RNA 古生菌、细菌（细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌） 真核细胞 型微生物 细胞核分化程度很高，有核膜核仁，细胞器完整 DNA 和 RNA 真菌 3、 病原微生物 ：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。
机会致病性微生物 ：在正常情况下不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。
4， 郭霍法则 ： 特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；该特殊病原菌能被分离培养得纯种；该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。
郭霍法则的特殊情况 5、免疫学：主动免疫；被动免疫。
第一篇 细菌学 第 一章 细菌的形态与结构 第一节 细菌的大小与形态 1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以 微米 为单位。
2、按细菌外形可分为： 球菌 （双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌） 杆菌 （链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌） 螺形菌 （弧菌、螺菌、螺杆菌） 第二节 细菌的结构 1、基本结构： 。

21、真核细胞型微生物的是 _. 4.属于非细胞型微生物的是 _. 二 ,判断改错题 1.原核细胞型微生物有完整的细胞器 . 2.真核细胞型微生物缺乏完整的细胞器 . 3.非细胞型微生物含有两种类型核酸 ,既含 DNA,又含 RNA. 三 ,选择题 【 A 型题】 1.下列病原体中属于真核细胞型微生物的是 A.支原体 B.放线菌 C.白色念珠菌 D.细菌 E.病毒 2.下列病原体中属于非细胞型微生物的是 A.立克次体 B.衣原体 C.噬菌体 D.螺旋体 E.支原体 3.下列病原体中属于原核细胞型微生物的是 A.噬菌体 B.酵母菌 C.流感病毒 D.细菌 E.真菌 【 X 型题】 1.原核细胞型微生物是指 A.细菌 B.放线菌 C.支原体 D.衣原体 E.螺旋体 2.真核细胞型微生物是指 A.新型隐球菌 B.白色念珠菌 C.真菌 D.放线菌 E.立克次体 四 ,名词 解释 1.医学 微生物学 (medical microbiology) 2.菌株 (strains of bacteria。

22、 共性：个体微小、结构简单、进化地位低 3、六界分类系统： A非细胞结构生物 病毒界 B具细胞结构生物 原核生物界 蓝藻门 *（蓝细菌）真细菌纲 真核原生生物界 原生动物 真核藻类 真菌界 酵母菌 霉菌 动物界 微型后生动物 高低等动物 植物界 低等植物 高等植物 微生物 ： 病毒界、原核生物界 、真核原生生物界 、 真菌界 4、微生物对人类的影响（问答） P4 5、生物三域特征 古细菌 真细菌 真核生物 A 原核生物 B真核生物 细胞核具有核膜；能进行有丝分裂；细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器； C原生动 物 （ 35） D后生动物 是除原生动物以外的多细胞动物的统称，其中个体微小需借助显微镜或放大镜才能看清的称微型后生动物。
6、原核微生物与真核微生物比较 特性 原核微生物 真核微生物 核 拟核 完整的核 核膜 + 核仁 + DNA 只有一条，不与 RNA和组蛋白结合 一至数条，与 RNA和组蛋白结合 核糖体 70S，在细胞质中 80S在细胞质中； 70S在某些细胞器中 细胞器 无 有线粒体。

23、义 了解细菌的形态学检查方法及分离培养与鉴定。
,3,3/14/2019,前 言,细菌的微生物学检查 准确进行病原学诊断 为治疗和预防提供科学依据 防治原则 控制和治疗传染源 切断传播途径 保护易感人群,4,3/14/2019,第一节 细菌的微生物学检查,一、标本采集 根据疾病性质及感染部位不同，采集不同的标本 无菌采集，避免污染 采集的标本尽快送检,5,3/14/2019,第一节 细菌的微生物学检查,二、形态学检查法 革兰染色法：鉴别细菌 抗酸染色法 特殊染色法 压滴法 悬滴法,观察细菌动力,6,3/14/2019,第一节 细菌的微生物学检查,涂片干燥固定,步骤：,结晶紫初染,卢戈碘液媒染,稀释复红复染,95%乙醇脱色,（一）革兰染色法,水洗,结果：,革兰阳性菌：紫色,1min,镜检,水洗,1min,水洗,0.51min,革兰阴性菌：红色,7,3/14/2019,革兰染色法临床意义：鉴别细菌选择治疗用药与细菌致病性有关,第一节 细菌的微生物学检查,8,3/14/2019,压滴法,悬滴法,第一节 细菌的微生物学检查,9,3/14/2019,三、分离培养与鉴定,标本,。

24、菌（bacillus) 大肠杆菌电镜照片（10000）,螺形菌（spiral bacterium) 霍乱弧菌电镜照片（ 10000）,油镜（ 1000）,油镜（ 1000）,油镜（ 1000）,微生物的分布,微生物在自然界的分布极为广泛江、河、湖泊、海洋、土壤、矿层、空气以及人类、动物和植物的体表、与外界相通的腔道中，都有数量不等、种类不一的微生物存在。
微生物特点体积微小、结构简单、种类多、繁殖快、易变异、分布广等。
,微生物与人类的关系,1.非病原微生物绝大多数微生物对人和动、植物是有益的，而且有些是必需的。
正常情况下，寄生在人类和动物中微生物是无害的。
2.病原微生物少数微生物具有致病性，能引起人和动、植物的病害的微生物。
3.机会致病性微生物正常情况下不致病，只在特定情况下导致疾病的微生物。
,病害：丹毒和天花,丹毒,天花,病害：皮肤型炭疽,病害：破伤风、真菌感染、气性坏疽,第二节 微生物学和医学微生物学,微生物学（microbiology）生命科学的一个重要分支，研究微生物的种类、分布、形态、结构、代谢、生长繁殖、遗传、进。

25、等。
病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。
,2006.4,下呼吸道感染细菌学检验操作规范,3,社区获得性肺炎常见的病原菌有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、军团菌、肺炎支原体及肺炎衣原体等。
医院获得性肺炎常见的病原菌有铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和假丝酵母菌等。
,2006.4,下呼吸道感染细菌学检验操作规范,4,下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，可伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高，X线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症，严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭，因此临床诊断一般不难；细菌学检验能明确感染病原及药敏结果，有助于疾病治疗、流行病学调查和医院感染的监测。
临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1,2006.4,下呼吸道感染细菌学检验操作规范,5,2006.4,下呼吸道感染细菌学检验操作规范,6,一、送检指征,痰液标本是临床微生物学检验最常见的标本，但不是下呼吸道感染的最佳标本。
1. 咳嗽 咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症。

26、自适宜的条件下进行培养。
在规定时间内观察有无微生物生长，以判断药品是否符合要求确为无菌。
,一般注射剂系指本身不含任何抗菌或抑菌成分，而且其为水溶性的药品的无菌检查 特殊注射剂油剂性药物含抑菌或防腐成分药物,一般注射剂的无菌检查,直接接种法,需氧菌和厌氧菌的培养已全部采用硫乙醇酸钠培养基检查。
在同一培养基中，需氧菌在培养基表面生长，而厌氧菌在培养基内生长。
真菌检查用真菌培养基,硫乙醇酸钠培养基,硫乙醇酸钠 还原剂 亚甲蓝 氧化还原指示剂下层 厌氧 无色上层 需氧 蓝绿色,阳性对照：需氧菌：藤黄八叠球菌厌氧菌：产芽胞杆菌真菌： 白色念珠菌方法：在培养基中加入对照菌。
意义：阳性对照必须长菌，证明微生物确实可在应用的实验条件下生长。
,阴性对照：用未加药物和对照菌的培养基意义：证明培养基本身无菌。
,测试时用无菌操作法吸取一定量的药物加入各种培养基内在适宜的温度下培养，并每天观察作出记录。
如在规定时间内无任何微生物生长则可判定待检药品符合标准. 需氧菌、厌氧菌：37 天真菌： 25 天,特殊注射剂的无菌检查,、油剂性药物的检测油剂性药物。

27、复继续生长。
杀菌药物能杀死微生物，杀菌药物除去后，微生物仍然不能生长。
,药物的抑菌作用或杀菌作用是在一定条件下相对而言的。
在我们检测时，药物的作用受到用药时培养基的组成、温度、PH值及所用的菌种、菌量等各个因素有关。
虽然说体外抗菌试验有很多优点，但是由于体外抗菌试验没有复杂的体内因素影响，因此药物体外抗菌试验和体内抗菌试验可能会出现不一致的结果。
所以，一般我们在体外对药物进行测试后，有效的药再要进行体内试验，如果体内试验再次证实此药有效的话，才能推荐应用到临床。
,一. 药物的体外抑菌试验(一).药物的体外抑菌试验药物的体外抑菌试验是常用抗菌试验方法，其中最常用的方法用系列稀释法和琼脂扩散法。
,1.稀释法稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法两种。
这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度（MIC）：是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度，通常用gml或U/ml表示。
具体的液体培养基连续稀释法见书P224，固体培养基连续稀释法，又可分为平板法和斜面法。
,2. 琼脂扩散法利用药物在琼脂培养基中扩散，并在一定浓度范围内抑制细菌生长的原理进行的。
一般用于细菌和酵母菌的药敏试验。
,（1）. 滤。

28、肠埃希氏菌），分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属。
与人类有关的大肠杆菌统称为致泻性大肠杆菌，包括五种：肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）、黏附性大肠杆菌（EAEC）。
,卫生学意义,大肠菌群和大肠杆菌是评价卫生质量的重要指标，作为食品中的粪便污染指标。
食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，既可能有肠道致病菌存在，因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
,1 范围 本标准规定了食品中大肠菌群（Coliforms）计数的方法。
本标准适用于食品中大肠菌群的计数。
2 术语和定义 2.1 大肠菌群 :在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
,3 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 恒温培养箱：36 1 。
冰箱：2 5 。
恒温水浴箱：46 1 。
电子天平：感量 0.1 g。
均质器、振荡器、接种环,无菌吸管：1 mL。

29、扭逼宠兹七咯鞠鞋厘枫寅蒲状华恿贪傅贞逗滓烤闰第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,躲骗柏澄滁易眯吏敏糯盏耶疲汁蛙加结净石步憾哺玖贿要承纹赠亚啤甥吞第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,示轨惮缚蟹咒弟系碳很旗硒吻凉千始泌扦聪逆隅擞脸写嚷涣双则啪卞他午第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,七挂辩吹嫌戊捶弥确傻暇饶啼秒玛谗佐蛛只扼害漂惊尉烟此接指豺欣壕牺第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,蔑邪衡壤宠宙吞摆植帧寿翘奏桐骂萨甲室蛔爆央局频呢汛晶剧襟孤氛忠腋第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,担帘舷寂碉厄梗娱府构略窃龟基牢犊宅劣侠辛育昭峭傻虑筋黑县留铡改综第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,曙摘橇罪锦疚颧砧掸漫盗簿斤初侩笛昂谚旁痊劳媚菇茁毡噎札睦羡伍供迷第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,务昧共肛侣七亦菠忆侄浴娶涡昨橡依佐扰熊电只嗽鲤陋棋砸蹈社雇清肪汹第六章 药物制剂的微生物学检查第六章 药物制剂的微生物学检查,梅锁侧傅谴狠。

30、浮在空中，栖息于土壤各层，游弋于各类水域（海洋、湖泊、江河、沼泽），附着于人和动植物体表或体内，对人类和环境无时不在产生巨大的影响。
,微生物的作用,绝大多数微生物对人和动物是有益的，有些还是必不可少的。
微生物已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。
抗生素、酸奶、疫苗、酒类等等；,微生物的危害,微生物中也有一部分能引起人或动植物病害，这些具有治病性的微生物，称为病原微生物。
如人类的许多传染病（如感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。
从药品生产的卫生学而言，微生物对药品原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格、直接或间接对人类造成危害的重要因素。
,GMP与微生物,推行GMP目的：消灭污染、混药、差错污染的定义：当一个产品存在有不需要的物质时，它即受到污染。
污染的形式：尘粒污染、微生物污染,尘粒污染,尘粒污染：是指产品因混入不属于它的那些尘粒而变得不纯净。
尘埃、污物、棉绒、纤维以及我们的头发都是尘粒污染的潜在原因。
临床资料表明：如药品被72m的尘粒污染了，尤其是静脉注。

31、养基,繁殖培养基,保藏培养基,培养基特殊用途,基本培养基,加富培养基,选择培养基,鉴别培养基,测生理生化特性的培养基,Company Logo,www.themegallery.com,二、培养基配制原则,Company Logo,www.themegallery.com,三、培养基配制中各成分的定量,1、理论计算法酵母细胞合成反应式,碳源和能源+氮源+其他所需物质,细胞+产物+CO2+H2O+热量,C12H22O11+5.5O2+NH3,C6H11O3N+CO2+H2O,342,145,酵母固形物对蔗糖的得率应为：,YX/S=,145,342,1,1-R,Company Logo,www.themegallery.com,2、统计法（统计实验）3、连续培养法,甲醇,菌体浓度,其它营养成分,第三节 微生物培养方法,微生物培养技术发展特点 1、少到多 2、浅盘到后层固态、深层液态 3、固体到液体 4、静。